血液样本选择
每个人都是一个单独个体,血液样本也有差异。例如:疾病、药物、性别、身体状况、经期等等。
有些病人血液样本可能出现分离效果较差(部分女性分离不好),目前原因不明确。预实验标准选择成年健康男性样本。
【产品名称】
通用名称:样本密度分离液
【包装规格】
200mL/瓶
【预期用途】
样本密度分离液通过密度分离作用,用于样本中不同成分的分离,以便于对样本的进一步分析。
【检验原理】
外周血中单个核细胞包括淋巴细胞和单核细胞等细胞,其体积、形态和密度与其他细胞不同,红细胞 和白细胞等细胞密度较大,为 1.090 g/ml 左右,而淋巴细胞和单核细胞密度为 1.075~1.090 g/ml ,血小板为 1.030~1.035 g/ml 。为此,本公司将羟乙基淀粉和泛影酸按一定比例混合,调整 pH 值和渗透压,经过澄清 及除菌过滤后制成一种近于等渗的溶液 (分层液),经过密度梯度离心使一定密度的细胞按相应密度梯度分 布,从而将各种血细胞加以分离。
【主要组成成份】
本品为带有乳光或微乳光的注射水溶液,主要组成成份是羟乙基淀粉 (6%) 与泛影酸 (10%) 。
【储存条件及有效期】
常温避光保存,有效期 2 年。启封后无菌操作,有效期 2 年。
【适用仪器】
半径 15cm 水平转子离心机。
【样本要求】
本分离液要求血液为新鲜的抗凝血,血液收集时应无菌操作且在储存、处理和运输过程中避免冷冻和 冷藏。
【检验方法】
取新鲜抗凝血 1ml,与注射用生理盐水 1:1 混匀后,小心加于 2ml 的细胞分离液之液面上,以 600-800g 离心(半径 15cm 水平转子)20-30 分钟,此时离心管中由上至下细胞分四层。第一层为血浆层 (含血小板)。 第二层为环状乳白色淋巴细胞 (单核/单个核细胞层)。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层 (含大量 中性粒细胞) 。收集细胞放入含注射用生理盐水 4-5 毫升的试管中,充分混匀后, 以 500g ,离心20 分钟。 沉淀经反复洗 2 次即得所需细胞。(此方法效果较好,推荐使用)
【参考值(参考范围)】
收集细胞的得率大于 80% (通过细胞计数法获得结论) 。
【检验结果的解释】
由于各品牌离心机的性能不同,国内南北地区温度环境和四季的差异,可能影响分离效果,用户可以调节离心转数和离心的时间,摸索最佳的分离条件 (具体分离条件各实验室自定)。
【检验方法的局限性】
本试验要求,在正常大气压下,样本、分离液及分离环境温度为20℃±2℃ 。本分离液在低温时呈较高密度,在高温时呈较低密度。
【产品性能指标】
渗透压:280 - 340 mOsmol/ kg
内毒素:≤0.03 EU/ml
无菌:直接接种培养 14 天后培养基澄清
外观:带有乳光或微乳光的注射水溶液
装量:200mL±5mL
【注意事项】
- 本品仅用于体外诊断。
- 严禁使用过期产品。
- 常温避光保存,有效期2年。启封后无菌操作,有效期2年。
- 本品无对人体有害物质,接触皮肤清水清洗即可,如进入人眼,需用大量清水冲洗,如果仍有不适需及 时就医
- 产品使用后按医疗废物处理。
- 本试验要求,在正常大气压下,样本、分离液及分离环境温度为20℃±2℃ ,否则会影响质量。
【标识的解释】无
【参考文献】
1. 朱立军, 陈学清. 免疫学常用试验方法. 北京:人民军医出版社. 2000.
2. 王振法, 杨崇礼. 血液学诊断及图谱. 北京:新华出版社. 1997.
3. 鄂征. 组织培养. 北京:北京出版社. 1995.
4. 郑德先, 吴克复. 现在血液学研究方法与技术. 北京:北京医科大学中国协和医科大学联合出版社. 1999.