【产品简介】

脐带血收集采用自然放血且从产房采集到细胞分离时长一般大于 2 小时，与外周血静脉 采血且及时分离相比会影响分离效果，为此，灏洋优化配方以提高脐带血 PBMC 分离得率， 请广大医疗及科研用户使用并提出宝贵意见。

【包装规格】

【实验前准备】

适用仪器：最大离心力可达 1200g 的水平转子离心机

【检验方法】

全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。

方法一：

1.   新鲜抗凝脐血与生理盐水及红细胞沉降液（6%羟乙基淀粉）按 1：1：1 的比例混合，自 然沉降 30min（具体沉降时间应根据不同样本对应调整以保证沉降效果）。

2.   沉降后取上层液体，300g 离心 15min，弃去 50%上清，以剩余 50%上清重悬沉淀，制成 细胞悬液。

3.   取 50mLPBMC 高效离心管，加入 15ml 分离液，200g 离心 1min 将分离液全部离心至隔 片以下，倾去隔片上残留的分离液。

4.   将细胞悬液加至隔片上，400-500g，离心 20-30min。

5.   离心后取白色环状目的细胞层，清洗后重悬备用。

方法二：

1.   新鲜抗凝脐血与红细胞沉降液（6%羟乙基淀粉）按 1：1 的比例混合。

2.   取 50mLPBMC 高效离心管，加入 15ml 分离液，200g 离心 1min 将分离液全部离心至隔 片以下，倾去隔片上残留的分离液。

3.   将与沉降液混匀的样本加至隔片上，400-500g，离心 25min。

4.   离心后取白色环状目的细胞层，清洗后重悬备用。

【注意事项】

1. 全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。为获得最佳的实验结果， 最好在取血 2h 内进行实验，血液存放时间越长，细胞分离效果越差。血液放置超过 6h 后分离效果更差甚至不能达到分离目的。

2. 本实验最好不要使用高聚合材质（如聚苯乙烯）的塑料制品，应使用无静电、低静电离 心管及未经碱处理过后的玻璃制品，因为静电作用将导致细胞贴壁、碱处理的玻璃表面 会变成毛面，影响细胞分离效果。

3. 如实验后细胞得率或活性过低，请联系技术支持以寻求帮助。

【储存条件及有效期】

常温保存，有效期 2 年。本品易感染细菌，需无菌条件操作。无菌条件下操作，启 封后置常温保存。如 4℃保存，本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。

【参考值（参考范围）】 本实验淋巴细胞提取率及纯度均大于 80%。

下表为成年人外周血中各种细胞的数量及比例，用户可适当进行参考。