人淋巴母细胞纯化和死细胞去除分离液试剂盒

品牌：天津灏洋/TBD

储存：常温保存，有效期2年。启封后置常温保存

【产品规格】
100ml/Kit
【产品组成】
为方便广大用户使用，试剂内容如下：

【实验前准备】
1.    适用仪器
最大离心力可达 1200g 的水平转子离心机
2.    无菌硅化离心管

【检验方法】
全过程样本、试剂及实验环境均需在  20±2℃的条件下进行。
1.    收取经PHA（或其他抗原、有丝分裂原）刺激的单个核细胞（人全血单个核细胞分离液， 产品货号；LDS1075）或含较高比例异型的单个核细胞（如肾综合征出血热患者），以 样本稀释液（产品货号：2010C1119）制成单细胞悬液，细胞数量：2×10⁸-1×10⁹ 个/ml。
2.    梯度分离溶液制备，使用梯度制备稀释液参考下表将原液稀释至所需浓度：

3.    梯度分离层的制备：将梯度分离液由高密度至低密度逐层加入至离心管内，每层约 1.5ml 加入后应可见明显的梯度界面。
4.    上样：将单细胞悬液   1ml（样本体积及细胞浓度不宜过高，否则影响细胞的分离及回收） 加至梯度界面上。 
5.    离心：400g，离心 20-25min。
6.    取样：位于管底的淋巴细胞为小淋巴细胞，两层分离液之间为淋巴母细胞，纯度及回收 率在 80%以上，位于 50%浓度分离溶液表面的是死细胞。
注：样本量加大时请客户选取对应耗材且按比例增加试剂用量，但应注意加入试剂及样本后 总体积不超过离心管总体积的 2/3。
【注意事项】
1.    实验全过程需在  20℃±2℃下进行，否则影响离心效果。
2.    由于多层分离溶液之间密度差别不大，因此离心机加速、降速时要慢，要平稳。
3.    试剂瓶盖需盖紧，防止蒸发和污染。
【储存条件及有效期】
常温保存，有效期 2   年。本品易感染细菌，需无菌条件操作。无菌条件下操作，启 封后置常温保存。如  4℃保存，本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。
备注：TBD0054SOP