人  外周血  白细胞  

人外周血白细胞分离液 （医用级/内毒素<0.5EU）

品牌：天津灏洋/TBD点击下载说明书

储存：常温保存，有效期2年。启封后置常温保存

【产品规格】
200ml/Kit
【产品组成】 
为方便广大用户使用，试剂内容如下：

【实验前准备】
1.    适用仪器
最大离心力可达 1200g 的水平转子离心机
2.    抗凝剂的选择 在动物实验采血时，很多实验者选择医用真空采血管获得抗凝血，医用采血管中的抗凝剂只考虑血浆质量，但不利于高纯度细胞分离实验。
为此，天津灏洋特别开发出专利抗凝剂及抗凝管专用于细胞分离，改变使用普通采血管 获得抗凝血分离效果不佳，提取率及纯度低下的不良结果。

3.    无菌硅化离心管

【检验方法】
全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。 首先取抗凝血，根据样本量大小，分以下两种情况： 
情况 A：血液样本量小于 5ml 时，实验方法如下：
1.    取一支离心管，先加入 5ml 分离液。
2.    用吸管小心吸取血液样本加于分离液液面上，500-800g，离心 20-30min（注：如改 变血液样本及分离液用量，需相应调整离心力及离心时间，具体离心条件需客户自行摸 索，以达到最佳分离效果。）
3.    离心后用吸管小心吸取所有环状乳白色细胞层（一层或两层），加入 10 ml 清洗液（产 品编号：2010X1118），混匀细胞。250g，离心 10min。重复洗涤 2-3 次，即得所需白细 胞。
4.    如有红细胞残留请使用红细胞裂解液（产品编号：NH4CL2009）裂解红细胞，具体操 作方法详见“红细胞裂解液使用说明”。
情况 B：血液样本量大于等于 5ml 时，实验方法如下：
1.    取一支适当的离心管，先加入与样本等量的分离液。
2.    将血液样本小心加于分离液之液面上，550-850g（最大离心力可至 1000g），离心
20-30min。（注：根据血液样本量确定离心条件，血液量越多，离心力越大，离心 时间越长，具体离心条件需客户自行摸索，以达到最佳分离效果。加入血液样本后，样 本及分离液总体积不得超过离心管总体积的三分之二）。
3.    剩余步骤同“情况 A”中步骤 3 与步骤 4。
【注意事项】
1. 全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。为获得最佳的实验结果，最 好在取血 2h 内进行实验，血液存放时间越长，细胞分离效果越差。血液放置超过 6h 后 分离效果更差甚至不能达到分离目的。
2. 本实验最好不要使用高聚合材质（如聚苯乙烯）的塑料制品，应使用无静电、低静电离 心管及未经碱处理过后的玻璃制品，因为静电作用将导致细胞贴壁、碱处理的玻璃表面 会变成毛面，影响细胞分离效果。
3.  分离液用量大于稀释后血液样本时，分离效果更佳。
4.  当血液样本粘度过高需稀释时，最优稀释方法：将血液与样本稀释液（产品编号：2010C1119）1:1 稀释混匀备用。注：不当的稀释方法会降低细胞得率及活性。如血液样 本经过稀释则分离过程中需适当降低离心力和离心时间。
5.  如实验后细胞得率或活性过低，请联系技术支持。 
【储存条件及有效期】
常温保存，有效期 2 年。本品易感染细菌，需无菌条件操作。无菌条件下操作，启 封后置常温保存。如 4℃保存，本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。
【参考值（参考范围）】 本实验白细胞提取率及纯度大于 80%。
下表为成年人外周血中各种细胞的数量及比例，用户可适当进行参考。

【可能存在的问题及解决方法】
1.    由于血液粘度、细胞密度等差异可能造成的问题及解决方案如下表所示：

2.    本分离液分离细胞的原理为密度梯度离心，其密度与温度、大气压等密切相关。不同地区客户可根据当地情况对离心条件进行适当调整。建议对离心条件进行调整时，恒定离 心时间，对离心转速进行调整。
3.    本分离液依照国际标准，全部使用药用级原料，性能指标与国产同类产品略有不同，可 能出现红细胞沉降不完全的情况，可以适当加大离心转速。
注：在对离心条件进行调整时，离心转速的加减以 50-100g 为基数，直至达到最佳分离效果， 离心力最小不得小于 400g，最大不得大于 1200g。离心时间以 20-30min 为准。
【医疗器械生产备案凭证编号】津滨食药监械生产备 20160002 号 
【医疗器械产品备案凭证编号】津械备 20190303 号
【产品技术要求编号】津械备 20190303 号
【说明书核准日期】20190328
【说明书修改日期】20201022