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密度梯度分离 > 即用型分离液

人  中性粒细胞  外周血  

Polymorphprep

品牌:Serumwerk Bernburg AG点击下载说明书

储存:+4 °C to +30 °C,无菌,避光

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1895250mL806  725现货

详细说明


Polymorphprep

人多形核细胞分离液/Isolation of human polymorphonuclear cells

Polymorphprep是一种即用型、无菌、内毒素含量很低的分离人外周血中多形核白细胞 (PMN:polymorphonuclear leukocytes)的分离液。

人血液中,除嗜碱性粒细胞外,多形核白细胞 (PMN:polymorphonuclear leukocytes) 的浮力密度比单个核细胞大得多,>1.085 g/ml。不幸的是,红细胞的浮力密度往往为 1.09 – 1.11 g/ml,这使得使用类似于用于单个核细胞的密度屏障从全血中分离更加困难。

为了克服这些困难,已经开发了许多方案。

Polymorphprep 的高渗透压导致红细胞失水并收缩,从而增加其有效浮力密度。这允许葡聚糖聚集的红细胞通过致密介质迅速沉淀。

因为分离介质和红细胞之间的渗透梯度随着细胞进一步沉降到分离介质中而下降(即红细胞的水分损失在 Polymorphprep 的顶部最大,随着它们进一步沉降而逐渐降低)——泛影酸盐梯度在内部形成密度屏障。 PMNs 带处于此密度梯度内,而单个核细胞则保持在样品/介质界面处。

使用特定的 LAL 测试检查每批 Polymorphprep 的内毒素水平。我们的目标是生产内毒素水平低于或等于 0.13 IU/ml 的批次。

该方法仅对未稀释的全人血有效,对富含白细胞的部分或来自动物物种的血液无效。

温度对于获得最佳结果很重要,因为温度的变化会影响 Polymorphprep 溶液的密度和粘度。 血样和分离介质的温度应保持在 18 – 22 °C 之间。使用 Coulter STKR 细胞分析仪对 Polymorphprep 分离的顶部和底部条带进行分析,如右图所示。 分析仪将样品中的细胞数量(纵坐标)确定为细胞体积(横坐标)的函数。 相对细胞数是特定体积的细胞数,表示为每个样品中细胞总数的一部分。

Polymorphprep 顶部的细胞带仅包含外周血单个核细胞 (PBMC)。 细胞带本身可分为淋巴细胞(上层,1)和单核细胞(下层,2)。

所有的 PMN 都位于底部细胞带中,该带包含在 Polymorphprep 溶液中。 红细胞对 PMN 条带的污染占总细胞数的 2 – 6 %。

相关技术参数:

泛影酸钠/Sodium diatrizoate13.8   % (w/v)
聚蔗糖/Polysucrose8.0   % (w/v)
密度/Density1.113   ± 0.001 g/ml
渗透压/Osmolality445   ± 15 mOsm
内毒素/Endotoxins<   1.0 IU/ml

分离效果图:

*10/25/2021 告知有关 Polymorphprep 中渗透压规格的更改。 Polymorphprep 中渗透压的新规格现在为 440-500 mOsmol/kg(之前为 445+/-15 mOsmol/kg)。 2021 年以后的所有生产批次都将受到这一变化的影响。新规范不会对分离产生任何影响。增加渗透压的主要优点是理论上更有效地将红细胞与其他血液成分分离。我们可以确保所有其他参数都不会受到这种适应的影响。

厂家产品网页链接:https://diagnostic.serumwerk.com/products/polymorphprep/