密度梯度分离 > 特殊细胞分离液

人富含NK活性大颗粒淋巴细胞(LGL)的纯化试剂盒
品牌:天津灏洋/TBD
储存:常温保存,有效期2年。启封后置常温保存
| 货号 | 规格 | 价格 | 货期 |
|---|---|---|---|
| NK2011H | 100mL/KIT | 500 425 | 现货 |
详细说明
【产品规格】
100ml/Kit
【产品组成】
为方便广大用户使用,试剂内容如下:
名称 | 产品编号 | 规格 | |
|---|---|---|---|
A | 密度梯度分离液原液 | NK2011H-A | 100ml |
B | 梯度制备稀释液 | NK2011H-B | 100ml |
C | 说明书 | 1 份 |
【实验前准备】
1. 适用仪器
最大离心力可达 1200g 的水平转子离心机
2. 抗凝剂的选择
在动物实验采血时,很多实验者选择医用真空采血管获得抗凝血,医用采血管中的抗凝 剂只考虑血浆质量,但不利于高纯度细胞分离实验。
为此,天津灏洋特别开发出专利抗凝剂及抗凝管专用于细胞分离,改变使用普通采血管 获得抗凝血分离效果不佳,提取率及纯度低下的不良结果。
序号 | 产品名称 | 产品货号 | 规格 |
|---|---|---|---|
1 | TBDTM 细胞分离专用抗凝剂 | TBDTM-0050 | 100ml |
2 | TBDTM-0200 | 200ml | |
3 | TBDTM-0500 | 500ml | |
4 | TBDTM 实验动物一次性使用负压采血 管(随试剂盒附赠 5 支) | TBDTM-0001 | 5ml/支 |
3. 无菌硅化离心管
序号 | 产品名称 | 产品货号 | 规格 |
|---|---|---|---|
1 | 无菌硅化离心管/10m(l 随试剂盒附赠 5 支) | TUB2015 | 100 支/包 |
【检验方法】
全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。
1. 收集从外周血中分离的单个核细胞(人全血单个核细胞分离液,产品货号;LDS1075):1×108个悬于 1ml 无血清培养基中。
2. 梯度分离溶液制备,使用使用梯度制备稀释液参考下表将原液稀释至所需浓度:
原液浓度(%) | 83% | 79% | 73% | 70% | 66% |
|---|---|---|---|---|---|
比重(g/ml) | 1.067 | 1.064 | 1.061 | 1.058 | 1.056 |
3. 梯度分离层的制备:将梯度分离液由高密度至低密度逐层加入至 10ml 离心管(试管)内,每层约 1.2-1.5ml 加入后应可见明显的梯度界面,同时标记 70%层上部界面及 73%底部界面位置。
4. 上样:将单个核细胞单细胞悬液 1ml 加至梯度界面上。
5. 离心:400g,离心 20-25min。
6. 取样:吸取 73%与 70%溶液界面及上下两层分离溶液(即步骤 3 标记位置之间的溶液), 细胞经洗涤后供后续试验。
注:样本量加大时请客户按选取对应耗材且按比例增加试剂用量,但应注意加入试剂及样本 后总体积不超过离心管总体积的 2/3。
【注意事项】
1. 实验全过程需在 20℃±2℃下进行,否则影响离心效果。
2. 由于多层分离溶液之间密度差别不大,因此离心机加速、降速时要慢,要平稳。
3. 试剂瓶盖需盖紧,防止蒸发和污染。
【储存条件及有效期】
常温保存,有效期 2 年。本品易感染细菌,需无菌条件操作。无菌条件下操作,启 封后置常温保存。如 4℃保存,本分离液易出现白色结晶,影响分离效果。
