人  单个核细胞  淋巴细胞  骨髓  脐带血  外周血  

Lymphoprep

品牌：STEMCELL点击下载说明书

储存： 4 - 30度，避光

Lymphoprep 人淋巴细胞分离液(即用型)

Lymphoprep是利用密度梯度离心从人外周血、脐带血、以及骨髓中分离出单个核细胞(MNC:Mononuclear cells)(包括淋巴细胞lymphocytes和单核细胞monocytes)的无菌、内毒素含量低的即用型分离液，具有与cytiva/思拓凡（原GE Healthcare）公司的昂贵的Ficoll-Paque PLUS和Ficoll-Paque PREMIUM分离液同样的指标。Lymphoprep可以用于替换Ficoll-Paque PLUS或Ficoll-Paque PREMIUM，而操作过程无需任何改变。

对于大多数正常人和病人的样本，Lymphoprep都能够快速、简单、可靠地得到优异的分离效果。

参数

主要成分：泛影葡胺钠(Sodium diatrizoate)：9.1% (w/v)；多聚糖（polysacccharide）：5.7% (w/v)

密度：1.077±0.001g/ml

渗透性：290±15mOsm

内毒素含量：<1.0EU/ml

灭菌：已灭菌

分离所得单个核细胞中红细胞的含量：整个细胞数目的3-10%。

分离原理

单个核细胞(MNC)的密度低于粒细胞(Granulocytes)和红细胞(Erythrocytes)，利用密度在1.077g/ml而且近于等渗的Lymphoprep溶液作为屏障作密度梯度离心时，红细胞和粒细胞由于密度大，故穿过Lymphoprep沉于底部，而单个核细胞密度等于或稍低于Lymphoprep分离液，故位于分离液界面上，从而在血浆和Lymphoprep的界面上获得单个核细胞。Lymphoprep分离液含有多聚糖（polysacccharide）,多聚糖能增强红细胞的聚集，从而使红细胞更易于沉降。

使用方法

1、保证Lymphoprep分离液的温度在15度-25度。

2、去掉瓶盖，将瓶子颠倒几次，以保证瓶子内溶液均匀。

3、按下述方法用注射器或移液器吸出Lymphoprep分离液：

    注射器

    将瓶子倒过来至合适的角度，注射器针头扎过橡胶瓶盖，吸取所需体积的Lymphoprep分离液。

    移液器

• 提起铝环并拉下金属密封圈，取下银环。

• 使用无菌技术，取出橡胶瓶塞，取出所需体积的Lymphoprep分离液。

• 使用无菌技术，重新塞入橡胶瓶塞。

4、将吸取到的Lymphoprep分离液加到离心管中（体积的选择参照下表）

5、按照上表将血液稀释。

6、小心地将稀释后的血液铺加到离心管里面的Lymphoprep分离液上面，注意尽量不要将血液和分离液的界面混了，要界面分层清晰。

7、在室温下（20摄氏度左右），用水平转子离心机，关闭制动器的情况下，800g的离心力，离心20分钟。（如果血液存放时间超过2小时——从人体抽出算起，离心时间延长为30分钟）。

8、用移液管直接吸取血浆和Lymphoprep分离液界面处的淋巴细胞层，注意，不要去除上面的血液层，而是直接吸取。移至另一离心管中。

9、加入稀释液，离心，得到的沉淀即为单个核细胞，即可用于后续的实验。

注意事项：

该分离液用于人（也有客户反馈可以用于大鼠）。